Vsebina
- Boljša vizualizacija
- Identifikacija in razvrstitev
- Zaznavanje izvedljivosti
- Identifikacija celičnih struktur
Mikrobiologi s mikroskopom preučujejo značilnosti mikroorganizmov, kot so alge, bakterije, protozoe, glivice in virusi. Čeprav se nekateri organizmi, kot so protozoe in celice kvasovk, z lahkoto vidijo skozi stekelca, bakterijske celice zahtevajo barvanje. Znanstveniki so razvili številne metode, kot so tehnika barvanja po Gramu, barvanje s hitro kislino in fluorescentno barvanje za izboljšanje vizualizacije bakterijskih celic in celičnih struktur. Z uporabo takšnih metod barvanja je mogoče identificirati strukturne značilnosti, ki pomagajo razvrstiti bakterije.
Boljša vizualizacija
Bakterijski organizmi so tako majhni, da jih je večina vidna le pod mikroskopom z velikostjo povečave 1000-krat. Vendar pa preprosta širitev ne zagotavlja zadostne stopnje jasnosti, zato je treba bakterije obarvati pred opazovanjem, da se zagotovi jasnost, potrebna za vizualizacijo.
Identifikacija in razvrstitev
Barvanje bakterij za razlikovanje med vrstami bakterij je znano kot diferencialno barvanje. Barvanje po Gramu je diferencialno barvanje, ki razlikuje bakterije kot funkcijo vsebnosti celične stene. Pri tej metodi bakterijske celice reagirajo s kristalno vijoličnim barvilom, da postanejo vijolične. Z dodajanjem sredstva za razbarvanje nekatere bakterijske celice izgubijo barvo, druge pa ne. Z dodajanjem safraninovega barvila obarvamo celice rdeče barve, medtem ko bakterijske celice, ki ne izgubijo barve, ostanejo vijolične. Rdeče celice imenujemo gramnegativne organizme in tiste, ki se ne obarvajo rdeče, razvrstimo kot gram pozitivne organizme. Tehnika barvanja po Gramu zagotavlja hitro metodo za začetno identifikacijo bakterij, ki sodelujejo pri okužbah. Prav tako kislinsko odporni postopek obarvanja pomaga posebej določiti organizme, ki spadajo v razred bakterij, imenovanih mikobakterije, kot je Mycobacterium tuberculosis.
Zaznavanje izvedljivosti
V vzorcih bakterijske kulture je pogosto pomembno odkriti prisotnost živih bakterijskih celic. Metode, kot je fluorescentno barvanje, pomagajo ugotoviti, ali so kulturne celice sposobne preživetja ali ne. Žive bakterije imajo sposobnost pretvoriti tetrazolijev klorid 5-ciano-2,3-ditolil (CTC) v barvilo, ki kaže rdečo fluorescenco. Torej, kadar kulture, ki vsebujejo CTC, oddajajo te fluorescence, to kaže na prisotnost živih bakterij. Propidij jodid je barva, ki deluje samo na nežive celice, ki imajo poškodovane membrane in je zato uporabna pri identifikaciji mrtvih bakterijskih celic.
Identifikacija celičnih struktur
Barvanje zagotavlja jasno vizualizacijsko metodo za različne celične strukture. Na primer, metoda Feulgenovega obarvanja omogoča identifikacijo jedra v bakterijskih celicah, medtem ko je Albertovo barvanje uporabno pri vizualizaciji metakromatskih granul. Prav tako tehnika impregnacije srebra omogoča identifikacijo spirotej. Če se barvajo z barvilom Ryu, se z lahkoto vidijo. Malahitno zeleno obarvanje pomaga identificirati bakterijske spore.
