Vsebina
Študije z mikrobnimi kulturami pogosto zahtevajo identifikacijo organizmov, ki so v njih prisotni. Ko na agar, ki vsebuje hranilni medij, nanesemo majhen del kulture, lahko množico bakterij ločimo v posamezne enote, ki tvorijo kolonije. Vsaka od teh enot se razvije v ločenih kolonijah, ki kažejo značilnosti, ki pomagajo prepoznati organizem.
Namen
Študije mikrobiologije zahtevajo preučevanje morfologije določenih organizmov. V nekaterih primerih je treba organizme, ki so prisotni v mešani kulturi, ločiti, preden jih je mogoče analizirati. Zato je pomembno izolirati te mikrobne kolonije. Bakterijske kulture vsebujejo veliko število celic v eni kapljici. Setev z izčrpavanjem na agar ploščo jih razredči, tako da se ena bakterijska celica odloži na določenem območju plošče. Več teh posameznih celic je vmes ločenih nekaj milimetrov. Vsak od njih se razdeli in tvori na tisoče novih celic, ki povzročajo izolirane kolonije.
Načelo
Agar plošča zagotavlja medij, bogat s hranili, ki spodbuja rast in razmnoževanje mikroorganizmov. Pri sejanju odplak se uporablja metoda kvadrantskega striranja, pri kateri je celotna plošča razdeljena na štiri kvadrante. Ko se premikate iz enega kvadranta v drugega, se postopoma redči izvorna kultura na celotni razpoložljivi površini. Kvadrant, v katerem začnete, kaže gosto in nerazlikovano rast mikrobov, ki je videti kot preproga mikroorganizmov, medtem ko zadnja prikazuje izolirane kolonije.
Materiali
Za sejanje izpušnih plinov so potrebne hranilne agar plošče, zanka za inokulacijo, gojenje bakterij, razkužilo, kot je 10-odstotni lizol, in Bunsenov gorilnik. Potrebovali boste tudi varnostno opremo, kot so predpasnik, rokavice in zaščitna očala. Inokulum za nastanek strij je narejen iz kulture bakterij z uporabo zanke in praskanja plošč hranilnega agarja. Bunsenov gorilnik je namenjen zažiganju ročaja med utori. Pred začetkom poskusa z razkužilom očistite površino.
Metoda
Z majhno količino inokuluma posejte v prvi kvadrant s premikanjem naprej in nazaj. Zažgite ročaj in ga pustite, da se ohladi, tako da se dotaknete dela agarne plošče, ki ni bil cepljen. Dotaknite se ga na enem koncu površine, ki ste jo pravkar posejali, in jo nato raztegnite v drugi kvadrant. Znova vžgite in ohladite zanko, na drugem območju pa obdelajte tretji kvadrant. Ponovite isti postopek s četrtim kvadrantom.
